在体外ADME
吸收、分布、代谢和排泄的评估(in体外化合物的ADME性质是支持化合物在发现和开发中的发展的关键组成部分。
吸收
渗透检测
药物通透性是药物口服吸收的重要组成部分。药物跨膜的通透性取决于被动通透性以及药物对药物转运蛋白的外排或吸收的敏感性。在Sygnature，可以使用多种方法来研究渗透率:
分布
蛋白结合
几个在体外结合试验包括血浆蛋白结合(PPB)，脑组织结合血浆分区(BPP)。可以根据特定的客户需求灵活地调整协议。
血浆蛋白结合
药物可与多种血浆蛋白结合，包括α-糖蛋白和白蛋白，结合程度可影响药物的药代动力学和药效学参数。只有血浆中的游离药物可被动扩散到血管外或组织部位，在那里可诱发靶点的药理作用。
评估血浆蛋白结合的主要方法是使用快速平衡透析(RED)设备进行分析。与超滤和高温透析等达到平衡相对较慢的其他方法相比，在该系统中，非特异性结合的影响被最小化。Sygnature的血浆蛋白结合试验使用RED来测量人类和临床前物种中测试化合物与血浆蛋白的结合百分比。
脑组织绑定
大脑的组成与血浆非常不同。血浆的蛋白质含量是大脑的两倍，而大脑的脂类含量是血浆的20倍。正是大脑游离浓度决定了受体的占用，从而决定了靶标的参与，对于没有主动转运的化合物，这应该等于稳定状态下游离血浆浓度。
Sygnature的脑组织结合试验使用RED来测量测试化合物与脑组织的结合百分比。脑组织结合是物种独立的，因此，大鼠脑组织结合可用于药物研发中获得其他物种和毒株的结合。亚搏手机版app下载
血浆分区
对化合物的血浆分配(BPP)的了解使我们能够合理选择适当的生物液体，无论是全血、血浆还是血清生物分析法的在活的有机体内PK样品，或校正缩放在体外清关数据在活的有机体内．
Sygnature的血浆分配试验提供了一种特异性和鲁棒性的测定方法，可以使用来自人类和临床前物种的新鲜血液在各种物种中测量这些参数。
新陈代谢
代谢稳定性
小分子的代谢主要通过细胞色素进行P450(CYP)家族的酶位于肝内质网，但也可以通过非CYP酶发生，包括酯酶和II期葡萄糖醛酸和硫转移酶等。
肠/肺组织代谢稳定性
除了肝脏，代谢也会发生在其他组织中，包括胃肠道、肺、皮肤和鼻粘膜，影响吸收。
- 口服给药后的首过代谢包括肠道和肝脏代谢，可影响口服生物利用度。如果吸入是建议路线，肺代谢可发挥重要作用。Sygnature的肠道代谢稳定性或肺代谢稳定性试验使用亚细胞组分，如来自人类和所有临床前物种的微粒体来评估肠道代谢。
药物相互作用分析
CYP450抑制
在优化过程中，通常评估代谢酶和研究药物之间潜在的药物-药物相互作用。
如果一种特定的代谢酶对药物清除的贡献为> 25%，则认为该酶对药物清除的贡献显著。建议在候选人选择期间进行表型研究和CYP诱导试验，或在怀疑有特殊责任的情况下更早进行，以调查有害的相互作用。
CYP感应
药物诱导细胞色素P450 (CYP)可显著加速共给受害者药物的代谢，引起严重的药物-药物相互作用。
迄今为止，已经对CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4的诱导进行了描述。CYP1A2的诱导涉及芳基烃受体(AhR)，而CYP2B6的诱导是由构成雄甾烷受体(CAR)介导的，CYP2C亚型和CYP3A4是通过孕烷X受体(PXR)共同诱导的。因此,当前的FDA指南建议研究CYP1A2、CYP2B6和CYP3A4的诱导作用。
传统上，通过评估人肝细胞中的酶活性来测定CYP的诱导。为了解决个体间的差异，必须使用至少三个供体的肝细胞制剂。
HepaRG是一种不朽的人类肝细胞系，科学家高度评价其肝细胞样表型，如其药物代谢酶的表达，药物转运体和转录因子。
因此，HepaRG为研究药物发现或药物开发早期阶段的CYP诱导提供了一个优秀的、高重复性和高成本效益的系统。亚搏手机版app下载
定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)测定mRNA水平已被证明优于酶活性，因为后者可能导致假阴性的结果，当CYP诱导被同时抑制掩盖。
排泄
可以使用业内一些最敏感的UPLC-MS仪器，如35500年Sciex Qtrap和3q Exactive Focus，可以对胆汁、粪便或尿液样本以及组织进行分析，以量化化合物和代谢物水平。
