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使用siRNA对NFκB信号传导Ikkβ基因沉默的影响VS CRISPR / CAS9

药物发现项目的成功依赖于支持遗传和亚搏手机版app下载药理学方法的组合支持目标验证的数据的质量。为了选择性地调节感兴趣的药物目标的表达,我们比较了RNAi和CRISPR / CAS9技术。虽然RNAi提供了一种快速的方法
瞬时消耗基因表达,Crispr / Cas9的方法提供稳定和完全的敲除,但可以花费大量的时间来隔离克隆。
一种优异的案例研究来比较不同方法是规范NFκB(例如P65 / P50)信号传导途径,因为它具有许多高质量的试剂,包括抗体,细胞系和小分子抑制剂。对该途径的兴趣目标是控制转录因子NFκB的定位的蛋白激酶Ikkβ。在激活促炎刺激如TNFα时,Ikkβ磷酸化IκBα的血度释放,导致其蛋白酶体降解,释放p65-p50异二聚体,然后释放到核诱导基因表达中以递增到细胞核中。Ikkβ还在Ser933的Ser933中磷酸化P105,其被切割成形成NFκB转录因子的P50分量。IKKβ,BI605906的小分子抑制剂阻断了这些信号传导事件。

这项工作是使用商业试剂作为内部研究计划进行的。亚搏体育客户端官方下载iosSygnature Discovery没有商业许可证来使用CRISPR,因此,不能作为其当前服务提供的一部分进行CRISPR,而无需参与相关的第三方。

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